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重组禽流感病毒H5亚型Re-7株在MDCK细胞上增殖条件的研究
陈宏,王博,赵海源,李金祥,赵博,李莉,王玉红,崔凯,朱长动
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(吉林冠界生物技术有限公司;中国农业科学院)
摘要:
为了探索重组禽流感病毒H5亚型Re-7株在MDCK细胞上的增值规律,确定最适的接毒量与最佳收获时间。将重组禽流感病毒H5亚型Re-7株接种至100 L生物反应器全悬浮无血清培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量,接种后不同时间病毒的HA、TCID50以及EID50。根据确定的最佳增值条件将病毒接种到MDCK细胞中进行大规模增殖培养。确定最适接毒量MOI为10-2,最佳收获时间为60 h。在100 L生物反应器中进行重复验证,获得稳定的试验结果,病毒HA达到1:1024,每1mL病毒含量达到107.33TCID50,每0.1 mL病毒含量达到106.83EID50。本研究为重组禽流感病毒H5亚型Re-7株的全悬浮规模化生产提供了相对稳定的参数指标。
关键词:  重组禽流感病毒  MDCK细胞  全悬浮培养  接毒量  收获时间  
DOI:
投稿时间:2017-12-04修订日期:2017-12-29
基金项目:
Research on Multiplication of H5 Subtype Re-7#$NBSRecombinant Avian Influenza Virus in MDCK Cell Culture System
(Jilin guanjie biotechnology co LTD)
Abstract:
Key words:  recombinant avian influenza virus  Madin-Darbin canine kidney(MDCK)  suspension

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